强健可靠:在高架加迷宫中测量焦虑
动物的焦虑模型通常依赖于简单设计的高+迷宫”。两个张开的手臂和两个闭合的手臂使研究人员能够以极快的速度、效率和可重复性研究许多与焦虑相关的行为,进一步的标准化可以提高这一点。
光照条件、昼夜节律、居住条件、习惯化方法、评分方法和观察者偏差都是科学界争论的话题。
EthoVision XT
自动跟踪软件,如Noldus的EthoVision XT,已经在消除观察者偏差和标准化评分方法方面迈出了一大步,以增加该测试的可靠性和可重复性。不同地点的研究人员可以使用共享的设置和软件设置来准确地比较结果,减少该测试的实验室间差异。然而,为了实现这个“通用模板”,必须考虑一些问题。
漫射照明的重要性
为了使跟踪设置标准化,实验室间的光照应该尽可能均匀,最好是尽可能分散。然而,啮齿动物根据光强显示出一种特定的焦虑样表型(以勒克斯为单位)。在非常微弱到完全没有照明(0 - 1勒克斯)的情况下,张开双臂的时间明显高于从2勒克斯开始的全或无阈值。
升高的正迷宫高度受趋向性的影响;与视觉[2]相比,接近垂直表面的倾向更依赖于触觉输入。
视频捕捉也得益于昏暗的灯光或完全黑暗,因为红外背光在这些低光照条件下提供了良好的能见度和老鼠与竞技场的对比。因此,照明可以被视为高架plus迷宫中的一种工具,因为它可以根据不同菌株和物种对光诱导焦虑的敏感性进行调整。
要不要在完全黑暗的环境中测试?
活跃期测试还是休息期测试一直是研究者们争论不休的话题。大鼠和小鼠是夜行性动物,这意味着它们在黑暗阶段最活跃,在光明阶段休息。
有规律的昼夜循环,被测试的动物将在晚上最活跃,其次是下午,然后是上午。如果昼夜交替,动物会在早晨表现出更高的活力。
然而,反向循环需要在红灯条件下工作,这被一些研究人员认为是困扰。在许多情况下,这是一个实验室内部后勤和/或实验计划的问题。
务实的做法似乎是最恰当的;平衡白天的测试顺序,但避免休息阶段的开始,这导致动物看起来昏昏沉沉,表现出很少的活动。
需要考虑的常见做法
- 习惯化进入测试室(如果与宿舍分开)是大多数行为测试前的常见做法,持续时间通常在30分钟到1小时之间。高架加迷宫也不例外,因为主要的结果参数是类似焦虑的行为,它应该得到额外的关注。
- 集团房地产通常用于啮齿类动物,因为大鼠和小鼠是群居动物。然而,动物被单独放置在测试装置中,这可以产生测试顺序效应,因为突然被笼子里的同伴排除在外的应激反应会极大地影响类似焦虑的行为。
这可以通过测试顺序的真正随机化来避免,或者也可以在测试前进行一段短暂的社会隔离(±10分钟)的习惯化。
此外,群居的大鼠和小鼠建立了社会等级,这反过来也影响了类似焦虑的行为。因此,最好在完成其他行为测试之后,量化这些层次结构是很重要的。
最重要的是,应该明确不能直接比较个体和群体饲养动物的数据。 - 清洁每次测试后的测试场地通常用30-70%的乙醇溶液完成。
这也可以做,完全干燥后,用水或醋酸溶液。
清洁竞技场的关键是确保所有动物的开始情况是相同的,因为它会使竞技场中之前动物的气味都相同。 - 避免在清洗笼子、称动物体重和/或更换食物的时候进行行为测试,因为这通常会增加压力和活动,影响高架加迷宫的结果。
当测试当天的干预和/或处理不可避免时,也可以将每个组/动物暴露在相同的情况下,这可以使结果标准化。
高架加迷宫被视为一种简单的焦虑筛选测试。然而,研究人员应该非常注意在他们的实验方法中充分描述环境,无论它们是标准的还是特殊的,因为这种测试被认为是简单的,确实有一些陷阱。
详细的报告可以确保一致性,但也可以为其他研究人员发现高架加迷宫中某些变化的原因,并从中学习进一步的实验提供一个很好的方法。
参考文献
[1] A. M. B. Garcia, F. P. Cardenas和S. Morato,“不同照明水平对高架加迷宫中大鼠行为的影响。”,”杂志。Behav。,vol. 85, no. 3, pp. 265–270, Jun. 2005, doi: 10.1016/j.physbeh.2005.04.007.
[2] G. B. Filgueiras, E. F. Carvalho-Netto和C. Estanislau,“升高的正迷宫中的厌恶:视觉和触觉线索的作用。””,Behav。工艺,第107卷,第106-111页,2014年9月,doi: 10.1016/j.beproc.2014.08.005。
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