通过追踪斑马鱼的活动来研究昼夜节律的一个关键因素
斑马鱼是许多研究人员,包括时间生物学家的热门模型。这是因为斑马鱼快速发育出它们的“生物钟”——它们的昼夜节律系统——而且这个系统非常容易被光线携带。
大多数斑马鱼的组织(在体内)有时钟,类似于哺乳动物的系统,可以在细胞系(体外)中研究。虽然这个生物钟系统的功能发展和组成斑马鱼“核心时钟”的基因已经被很好地理解,但核心振荡器如何功能的具体细节仍然不清楚。
酶活性对昼夜节律性的影响
Smadja Storz等人研究了CK1家族两种异构体活性的影响。CK1是酪蛋白激酶1的缩写,是一组酶,在包括昼夜节律性在内的许多过程中发挥调节信号转导的作用。研究人员研究了CK1δ和CK1ε活性在昼夜节律性中的重要性;在斑马鱼胚胎,幼体和细胞系中。
运动能力反映了节律性
为了确定节律性,研究人员研究了斑马鱼幼体在高通量环境下的行为(活动模式)。幼虫被放置在48个单独的孔板DanioVision观察室。行为跟踪是自动完成的EthoVision XT视频跟踪软件。
最初,将幼虫置于12h光照/12h昏暗光照条件下。在此之后,给予CK1抑制剂(对照组为DMSO),并将动物置于昏暗的光照条件下。在实验中,动物的活动被测量为10分钟时间窗口内移动的总距离。
CK1δ对维持昼夜节律性很重要
斑马鱼幼体在暴露于光/暗周期时,通常会发展出昼夜节律性,之后动物能够保持这种节律性,即使是在持续的光照条件下。正如预期的那样,在灯光持续变暗的时期,对照组表现出这种高活力/低活力的循环。在暴露于CK1δ抑制的幼虫中,这种节律性完全减弱。特异性的CK1ε抑制没有同样显著的效果。
为药理筛选和时间生物学研究提供了一个很好的水生模型
我们可以从这项研究中学到一些东西。特别地,本研究证明了CK1δ活性在斑马鱼生理节律性的正常发育和维持中的重要性。这也表明CK1ε活性起不太重要的作用。更广泛地说,它证明了斑马鱼和CK1抑制剂的效用是创建高通量模型的重要因素,用于昼夜节律相关药物的药理研究和其他时间生物学研究。
参考
Smadja Storz, S.;Tovin, a;Mracek p;阿龙,美国;福,n;Gothilf, Y.(2013)。酪蛋白激酶1δ活性:斑马鱼昼夜节律系统中的一个关键元素.《公共科学图书馆•综合》,8 (1), e54189。
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